期刊简介
本刊由卫生部主管，山东大学主办的国家级学术性期刊，国内外公开发行，被确定为外科学类，肿瘤学类，医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果，以及与临床密切结合的基础理论研究。
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首页>中国现代普通外科进展杂志
- 杂志名称：中国现代普通外科进展杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：山东大学
- 国际刊号：1009-9905
- 国内刊号：37-1369/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：华东地区优秀期刊期刊收录：万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建
刘执玉；高杰；房云海；董平；李贵宝；宋涛
关键词：血管内皮生长因子, 载体蛋白质类, 基因表达
摘要：目的:VEGF-C基因的真核表达载体,以便进一步研究VEGF-C基因在淋巴管生成中的作用.方法:根据人VEGF-C的cDNA序列,设计合成一对5'端分别含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的特异性引物,运用RT-RCR方法扩增人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的VEGF-C cDNA(1.26kb);回收PCR产物(1.28kb),并将其连接至克隆载体pUMT-18中,重组的pUMT-18在大肠杆菌DH5α内扩增后,经质粒提取、EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,筛选出阳性重组子,并进行基因测序鉴定;琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF-C cDNA全长的酶切片断(1.27kb),然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3.1(-)连接,重组质粒经EcoRⅠ和BamHⅠ酶切予以鉴定.结果:RT-PCR 产物含有VEGF-C cDNA,基因测序显示重组的pUMT-18中含有正确的人VEGF-C cDNA全长序列,重组的pcDNA3.1(-)中含有人VEGF-C cDNA全长序列.结论:VEGF-C/pcDNA3.1(-).
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