期刊简介
本刊由卫生部主管，山东大学主办的国家级学术性期刊，国内外公开发行，被确定为外科学类，肿瘤学类，医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果，以及与临床密切结合的基础理论研究。
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首页>中国现代普通外科进展杂志
- 杂志名称：中国现代普通外科进展杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：山东大学
- 国际刊号：1009-9905
- 国内刊号：37-1369/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：华东地区优秀期刊期刊收录：万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
构建细菌内同源重组型hTERT调控区反义RNA腺病毒载体
刘素侠；孙汶生；马春红；赵跃然；高立芬；梁晓红
关键词：人类端粒酶催化亚单位·基因, myc·腺病毒科·基因重排
摘要：目的:构建细菌内同源重组型端粒酶催化亚单位调控区c-myc结合位点的反义RNA腺病毒重组体.方法:PCR扩增hTERT启动子调控区c-myc结合位点370bp的DNA片段,与腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV连接,以抗生素平板筛选连接阳性的克隆,PCR鉴定方向,构建反向插入的hTERT-c-myc反义RNA腺病毒穿梭载体pShuttle-ashmyc,将PmeⅠ线性化的pShuttle-ashmyc与包装质粒pAdEasy-1共转染受体菌BJ5183进行同源重组.用含有卡那霉素的LB平板筛选同源重组阳性的克隆,酶切鉴定后,以Pac Ⅰ酶切线性化,转染包装细胞293,以软琼脂平板上的空斑数量计算重组腺病毒的滴度.结果:成功构建了端粒酶催化亚单位调控区c-myc结合位点的反义RNA重组腺病毒-pAd-ashmyc,滴度为1.2×109efu/ml.结论:hTERT调控区c-myc 结合位点的反义腺病毒载体的成功构建,为肿瘤的基因治疗奠定了良好的基础.
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