期刊简介

               本刊由卫生部主管,山东大学主办的国家级学术性期刊,国内外公开发行,被确定为外科学类,肿瘤学类,医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果,以及与临床密切结合的基础理论研究。                

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  • 杂志名称:中国现代普通外科进展杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:山东大学
  • 国际刊号:1009-9905
  • 国内刊号:37-1369/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:华东地区优秀期刊期刊收录:万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中国现代普通外科进展杂志2009年第11期

结直肠癌患者粪便细菌实时荧光定量PCR标准品制备方法的比较研究

郭世奎;包维民;龚昆梅;邵剑春;陈弟;王昆华

关键词:结直肠肿瘤, 粪便, 细菌, 实时荧光定量PCR
摘要:目的:比较结直肠癌患者粪便细菌实时荧光定量PCR标准品制备方法的优缺点及获得DNA的质与量.方法:以粪肠球菌作为试验菌株,分别采用标准菌株法、PCR扩增产物纯化法和PCR扩增目的片段割胶纯化法制备标准品,比较三者用于细菌实时荧光定量PCR标准曲线制作的好坏及用核酸蛋白检测仪Biophotmeter测定获得DNA的质与量.并将PCR扩增产物纯化法得到的产物进行测序.结果:PCR扩增目的片段割胶纯化法获得DNA的量及纯度均较低,为29.9±3.2和2.8±0.2,标准菌株法和PCR扩增产物纯化法的量及纯度均较高,分别为62.9±2.7及1.7±0.1,59.1±2.7及1.8±0.1;PCR扩增目的片段割胶纯化法与标准菌株法和PCR扩增产物纯化法相比,差异有统计学意义(P<0.05),标准菌株法和PCR扩增产物纯化法相比,差异无统计学意义(P>0.05),但以标准菌株法为佳.采用标准菌株法及PCR扩增产物纯化法,能获得很好的标准曲线(r=-1.00).并且纯化产物序列与目的片段序列完全相同.结论:标准菌株法及PCR扩增产物纯化法制备标准品作荧光定量PCR检测比PCR扩增目的片段割胶纯化法更适合肠道相关分子微生态的研究.