期刊简介

               本刊由卫生部主管,山东大学主办的国家级学术性期刊,国内外公开发行,被确定为外科学类,肿瘤学类,医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果,以及与临床密切结合的基础理论研究。                

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  • 杂志名称:中国现代普通外科进展杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:山东大学
  • 国际刊号:1009-9905
  • 国内刊号:37-1369/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:华东地区优秀期刊期刊收录:万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中国现代普通外科进展杂志2009年第09期

靶向线粒体转录因子A大鼠活体RNA干扰实验动物模型的建立

林恒;唐春;吴乔;冯春林;张玉君;别平

关键词:靶向线粒体转录因子A, RNA干扰, 慢病毒载体, 模型, 动物, 大鼠, Wistar
摘要:目的:在体外构建并筛选出靶向线粒体转录因子A(TFAM)的有效RNA干扰慢病毒载体,用于大鼠整体RNAi实验,观察其对肝组织中目的基因表达的干扰效果.方法:设计4条siRNA序列并合成双链DNAoligo,制备目的基因RNA干扰慢病毒载体,体外感染目的细胞,利用RT-PCR和Western blot的方法检测目的基因TFAM的表达情况,从而筛选出有效的干扰靶点.构建大鼠活体RNAi动物模型,观察大鼠肝脏中靶基因表达的变化情况.结果:酶切鉴定及测序结果均提示siRNA序列成功连接入载体中.RT-PCR结果提示3号靶点的干扰效率高,达到了55%左右,Western blot也验证了其干扰的有效性.大鼠活体RNAi结果显示,肝脏中目的基因的表达也明显减少,这种表达减弱具有特异性和靶向性.结论:TFAM靶向RNA干扰慢病毒载体构建成功,能有效抑制目的细胞中线粒体转录因子A的表达.构建的慢病毒载体在大鼠活体内也具有良好的干扰效果.该研究为下一步利用此慢病毒载体进行活体RNA干扰打下了基础.