期刊简介
本刊由卫生部主管，山东大学主办的国家级学术性期刊，国内外公开发行，被确定为外科学类，肿瘤学类，医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果，以及与临床密切结合的基础理论研究。
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首页>中国现代普通外科进展杂志
- 杂志名称：中国现代普通外科进展杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：山东大学
- 国际刊号：1009-9905
- 国内刊号：37-1369/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：华东地区优秀期刊期刊收录：万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
siRNA表达载体对乙酰肝素酶基因有效序列的筛选
陈少全；刘启志；宋京翔；王冰；王烈
关键词：RNA干扰, 乙酰肝素酶, MDA-MB-231细胞, 转染
摘要：目的:根据基因库中的人乙酰肝素酶(HPSE)基因序列,构建针对乙酰肝素酶基因的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后观察其对HPSE基因的干扰作用.方法:设计HPSE靶向的发夹状siRNA,合成两条互补的寡核苷酸链(共4对),退火后连接入pGPU6/GFP/Neo载体,转化后进行序列鉴定,脂质体转染MDA-MB-231细胞株,免疫蛋白印迹(Western blot)检测细胞蛋白质的表达.结果:设计出4条针对HPSE的siRNA,将退火后的双链寡核苷酸片段克隆到pGPU6/GFP/Neo载体,经过阳性菌落酶切鉴定与测序,结果正确,并通过脂质体转染方法转染到MDA-MB-231细胞株,Western blot检测细胞蛋白质的表达明显降低.结论:成功构建了针对HPSE基因的siRNA载体,转染MDA-MB-231细胞后,HPSE蛋白的表达降低,其中HPSE-A和HPSE-B可明显抑制HPSE的表达.
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