期刊简介

               本刊由卫生部主管,山东大学主办的国家级学术性期刊,国内外公开发行,被确定为外科学类,肿瘤学类,医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果,以及与临床密切结合的基础理论研究。                

首页>中国现代普通外科进展杂志
  • 杂志名称:中国现代普通外科进展杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:山东大学
  • 国际刊号:1009-9905
  • 国内刊号:37-1369/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:华东地区优秀期刊期刊收录:万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中国现代普通外科进展杂志2014年第11期

PEI增强G250 DNA疫苗和重组肽疫苗的prime-boost免疫策略研究

孙泽强;孙发海;阮喜云;李青;杨广笑;王全颖;郭忠义;刘庆勇

关键词:DNA疫苗, G250, PEI, 佐剂, prime-boost
摘要:目的:探讨PEI作为免疫佐剂对G250抗原肽基因PVAX1/C-G250肽-C免疫保护效果的增强作用及联合应用CAIX蛋白疫苗进行PRIME-BOOST免疫程序免疫增强效果.方法:用EcoR l、Xhol和EcoRI、Sall分别双酶切PVAX1及既往构建的pET28a (+)/C-G250肽-C质粒.利用DNA重组技术构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C,酶切分析鉴定.大量提取质粒并分光光度计测质粒含量.将32只雌性昆明小鼠随机分为(A)裸DNA组,(B)DNA-PEI复合物组,(C)DNA-PEI+蛋白疫苗组,(D)空白对照组.按O、1 0、20、30天程序经股四头肌注射免疫.C组在第20天及第30天进行蛋白冲击.初次免疫前和第40天鼠尾取血,ELISA法检测抗体滴度.流式细胞术测淋巴细胞亚群CD4+和CD8+.结果:酶切及基因测序鉴定证实G250抗原肽cDNA正确插入PVAX1/C-G250肽-C真核表达的重组质粒中.昆明小鼠经4次免疫后,3个实验组都产生了特异性的体液和细胞免疫反应,B组的抗体滴度1:1.28×104及CD4+、CD8+达26.12%和12.60%,明显高于A组的1:3.2×103和CD4+,CD8+占到19.32%和10.74%.而蛋白冲击组的1:5.12×104和CD4+,CD8+占到41.96%和15.14%,明显高于B组(P>0.05).结论:成功构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C.该DNA疫苗与PEI和G250蛋白疫苗联合使用后产生极强的免疫原性,诱导产生了高滴度、高特异性抗体及细胞免疫反应.证实G250DNA疫苗联合PEI使用并进行蛋白疫苗冲击的免疫策略可产生强大的免疫保护作用.为恶性肿瘤的术后辅助治疗提供新的思路和方法.