期刊简介

               本刊由卫生部主管,山东大学主办的国家级学术性期刊,国内外公开发行,被确定为外科学类,肿瘤学类,医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果,以及与临床密切结合的基础理论研究。                

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  • 杂志名称:中国现代普通外科进展杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:山东大学
  • 国际刊号:1009-9905
  • 国内刊号:37-1369/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:华东地区优秀期刊期刊收录:万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中国现代普通外科进展杂志2014年第04期

人白介素-8 shRNA慢病毒载体的构建和鉴定

张少波;何谦;郑晓宏;张诚华

关键词:白介素-8, RNA干扰, 慢病毒, 乳腺肿瘤, 基因沉默
摘要:目的:构建携载人白介素-8(IL-8)shRNA的慢病毒并鉴定其对MDA-MB-231细胞该基因的沉默效率.方法:设计两个IL-8基因特异性siRNA靶点,与pMagic7.1慢病毒载体质粒重组,经PCR鉴定并测序,通过293T细胞实现慢病毒包装,DNA定量试剂盒分别检测两种慢病毒滴度.将这两种慢病毒分别以佳感染复数感染MDA-MB-231细胞,通过Real-time PCR检测IL-8沉默效率.结果:PCR鉴定阳性的shRNA重组质粒测序正确,包装后两种病毒滴度分别为1.93×109 IU/mL和1.89×109 IU/mL;分别以MOI=40感染MDA-MB-231细胞后,IL-8沉默效率分别为80%和90%.结论:成功构建IL-8 shRNA慢病毒并达到较高的沉默效率,为下一步研究沉默靶基因后细胞生物学功能变化提供实验基础.