期刊简介
本刊由卫生部主管，山东大学主办的国家级学术性期刊，国内外公开发行，被确定为外科学类，肿瘤学类，医药卫生类核心期刊。以从事普通外科的临床工作者、科研人员和研究生为主要读者对象。报道普通外科领域内最新学术动态和进展、临床实践经验和原创性科研成果，以及与临床密切结合的基础理论研究。
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首页>中国现代普通外科进展杂志
- 杂志名称：中国现代普通外科进展杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：山东大学
- 国际刊号：1009-9905
- 国内刊号：37-1369/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：华东地区优秀期刊期刊收录：万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
STAT1干扰慢病毒载体的构建及其基因沉默效应测定
丁治国；何蓓；陈晓珩；李会龙；高翔；张韬；王鑫；李乃卿
关键词：STAT1基因, 慢病毒载体, RNA干扰, MHCC97L细胞
摘要：目的:构建STAT1基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体并测定其基因沉默效应.方法:根据人STAT1基因序列,设计干扰序列,将Oligo退火成双链并连接穿梭载体pLKO-1-EGFP-puro-shRNA,构建shRNA慢病毒载体质粒,并转化至感受态细胞DH5 α,进行测序验证.在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产慢病毒.慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L的STAT1过表达瘤株(MHCC97L-stat1),用Real-time PCR和Westem Blot检测RNAi组(MHCC97L-stat1-shRNA-1)和对照组(MHCC97L-stat1)中STAT1基因的表达情况,确定其干扰STAT1表达的有效性.结果:测序证实慢STAT1基因RNAi病毒载体质粒构建成功;慢病毒载体经293T细胞包装成功;慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L-stat1瘤株48h后,STAT1基因在mRNA水平和蛋白质水平上表达明显降低.结论:STAT1基因RNAi慢病毒载体构建成功,能够在人肝癌细胞MHCC97L-stat1瘤株中表达,并具有显著的基因沉默效果.
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